Terapia génica en Esclerosis múltiple

La EM es una enfermedad desmielinizante autoinmune. Los procesos de reparación (remielinización) que se observan al comienzo desaparecen con el paso del tiempo. De esta forma, la progresión en la EM puede ser consecuencia de un fallo en los mecanismos intrínsecos de reparación.

En la neuro(glio)génesis, a partir de un daño, las células precursoras del cerebro 

podrían emigrar a las zonas dañadas y repararlas.

Para dicho proceso, un grupo de investigadores han realizado pruebas de laboratorio en ratones con el factor inhibidor de la Leucemia, el cual, se ha podido ver que dicho factor acelera la reparación de las cèlulas afectadas.
Ademas de este, se  apunta  a que las células pluripotenciales, extraídas bien del cerebro de un embrión o bien de la parte límite de la cresta neural e inyectadas en un modelo experimental de ratón con el cordón posterior desmielinizado, migran a través de una inyección intratecal única y proliferan.

Ademas, comprueban que, independientemente de la zona de la que se extraigan las células precursoras del embrión, una vez inyectadas en el LCR, las células migran, se implantan y proliferan, independientemente del implante, como oligodendrocitos adultos. 

http://www.jneurosci.org/content/32/6/2100.full.pdf+html

http://www.esclerosis-cartagena.es/Prensa/Revision%20Novedades%20EM,Congreso%20octubre%202010.pdf

http://www.caltech.edu/article/13495

Animales transgénicos: usos y limitaciones en la medicina del siglo XXI

Se considera transgénico todo organismo vivo manipulado genéticamente mediante la inserción de un gen que no forma parte de su genoma original. Son muchas las áreas en las cuales los animales transgénicos han aportado enormes beneficios, tal el caso del sector pecuario, pero en este artículo sólo desarrollaremos aquellas de relevancia biomédica.
En la actualidad, tanto los procesos fisiológicos como muchas enfermedades humanas, están siendo analizados desde un punto de vista cada vez más "molecular".
La biología molecular aplicada a la medicina trae esperanza para el tratamiento de muchas enfermedades que podrían llegar a ser corregidas gracias a la biotecnología.
Parte importante e innegable de estos avances científicos, que ya forman parte de nuestra vida cotidiana, son los animales transgénicos, que día a día ayudan a comprender la fisiopatología de las enfermedades humanas al mostrar cuáles son los genes que se inducen o reprimen y cuáles las proteínas que se activan o inactivan. Existen organismos genéticamente modificados que son instrumentos para el ensayo de nuevas terapéuticas (fármacos, inhibidores enzimáticos, anticuerpos monoclonales, inhibidores de ARN y terapia génica entre otras).
Al día de hoy, esta tecnología ha permitido crear una enorme cantidad de "enfermedades simuladas". Existen modelos de tumores del sistema nervioso central de esclerosis múltiple.

http://www.scielo.org.ar/scielo.php?pid=S0325-00752010000400009&script=sci_arttext

BANCO DE CÉLULAS PRIMARIO (BCP) :CARACTERIZACIÓN Y PAPEL EN LA PRODUCCIÓN DE PROTEÍNAS RECOMBINANTES

Actualmente la Biología Molecular ha destacado novedosas técnicas de recombinación de los genes, que ocupan un lugar cimero en la elaboración de productos farmacéuticos.
Esta metodologìa llamada tecnologìa del ADN incluye manipulaciòn y ordenamiento de segmentos de àcidos nucleicos, con el fin de producir sustancias destinadas al diagnòstico, prevenciòn y tratamiento de diferentes patologìas que afectan a los seres vivos.
El BCP es un lote semilla consiste en un conjunto de alìcuotas homogeneas de un cultivo microbiologicamente puro que se almacena.
Este BCP es el primer paso para la producciòn de fàrmacos por la vìa del ADN recombinante.
Para esto se utilizan hospederos, y entre los mas usados son colonias de E. coli, levaduras y microorganismos superiores

http://elfosscientiae.cigb.edu.cu/PDFs/BA/1994/11/1/p%2055%20-%2059%20.pdf

ADN recombinante en EM del factor de necrosis tumoral

El factor de necrosis tumoral (TNF) es una citoquina proinamatoria, descubierta inicialmente en el
suero de ratones luego de la infección con endotoxinas bacterianas. Más tarde esta misma citoquina fue encontrada igualmente en ratas, conejos y en el hombre.
Posteriormente se identificaron dos formas moleculares, denominadas TNF-α o Caquexina y TNF-β o Linfotoxina (1, 2). El TNF pertenece a la superfamilia de  mediadores que llevan su nombre y a la cual pertenecen al menos 15 citoquinas.
TNF-α, citoquina secretada principalmente por células del sistema inmune, tales como los monocitos, macrófagos, neutrólos, células NK y linfocitos T, principalmente CD4+. De la misma manera, otras células pueden producirlo como respuesta a un estímulo, tales como astrocitos, microglías, miocitos y broblastos.
El TNF-α tiene una potente actividad citotóxica, capaz de asesinar células tumorales y de actuar como un mediador letal en la respuesta inmune aguda o crónica de enfermedades inamatorias crónicas e infecciosas.
Las principales actividades biológicas del TNF-α han podido ser reproducidas utilizando la proteína puri-
cada o recombinante:
• Producir necrosis hemorrágica de tumores, en injuria tisular y shock, gracias a sus propiedades proin-
amatorias sobre el endotelio vascular.
• Inducir apoptosis en algunos tumores y líneas celulares transformadas.
• Producir caquexia, al estimular la lipólisis, inhibir la
actividad de la lipoproteína lipasa en los adipositos
y estimular la lipogénesis hepática.

http://www.sochire.cl/bases/r-119-1-1343617851.pdf
http://www.bvs.hn/Honduras/SUN/SUN2008_archivos/Misc/Documentos/Synapsis/2007/Ene-%20Mar/Esclerosis%20Multiple.pdf

Técnicas moleculares para EM-Electroforesis

El procedimiento de laboratorio se llama electroforesis de LCR, un método utilizado para estudiar los niveles de proteína en el líquido cefalorraquídeo (LCR).

En la electroforesis, se aplica un gel (un medio sólido que permite el movimiento de las proteínas) a una muestra de LCR y luego se aplica un voltaje. Las proteínas migran a lo largo del gel sobre la base de su carga (aproximadamente de acuerdo con su tamaño). Se tiñe el gel y las cantidades significativas de proteínas similares harán que se presente una "banda" visible. El término bandas oligoclonales se refiere a la presencia en el LCR de dos o más bandas de proteínas de una inmunoglobulina específica (IgG) que tienen mayor intensidad que en la muestra concurrente de suero. Este patrón de bandas se observa en pacientes con esclerosis múltiple y otras condiciones.

Se lo considera como un mecanismo de confirmación adicional para la deteccion de esclerosis múltiple.En el LCR se realiza electroforesis de proteínas para detectar la presencia de bandas oligoclonales, que son más numerosas en casos de larga evolución de la enfermedad y asociadas a curso severo. Se determina además la concentración de albúmina, que normalmente no se sintetiza en el LCR, por lo que su presencia mide daño de la BHE. 

http://scielo.sld.cu/scielo.php?pid=S0864-21252006000200011&script=sci_arttext
http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/esp_presentations/100145_2.htm

Mecanismos genèticos moleculares en la esclerosis multiple

GENÓMICO:
Mutaciones:

• HLA clase II.- Es una familia de genes ubicados en el brazo corto del cromosoma 6 cuyos productos están implicados en la presentación de antígenos a los linfocitos T.
• IL7RA.-Constituyen el receptor de IL-2 de alta afinidad.Normalmente, una proteína integral de la membrana, IL2RA soluble se ha aislado y se determinó que el resultado de proteolIisis extracelulares. MRNAs aRIL2 alternativa empalmados han sido aislados, pero el significado de cada uno es actualmente desconocido. [2]
• IL2RA.-Normalmente, una proteína integral de la membrana, IL2RA soluble se ha aislado y se determinó que el resultado de proteolyisis extracelulares. MRNAs aRIL2 alternativa empalmados han sido aislados, pero el significado de cada uno es actualmente desconocido.
• Polimorfismos del receptor beta de células T.- Los linfocitos T reconocen antígenos a través de un receptor llamado RcT, por medio de las moléculas del complejo de histocompatibilidad Responden lisando las células que portan los antígenos, o bien, liberan citocinas que son los mediadores de la respuesta inmune Se conocen dos isotipos de RcT: el gama/delta y el alfa/beta, mismos que aparecen en ese orden durante la ontogenia de los linfocitos T .. nformación con los eventos extra e intracelulares que regulan su expresión génica en linfocitos T humanos, y asimismo analizar

EPIGENÓMICO:

• Emigraciòn en edades crìticas, en particular en torno a la pubertad.
• Disminuciòn en la producciòn y consumo de vitamina D
• Fumar
• Dieta
• Ingesta de hormonas.
• Climas frìos
• Abundante ingesta de grasa de origen animal
• Infecciòn por virus: varicela zoster, herpes virus 6, encefalitis por HLTV 1

PROTEÒMICO:
Interferon Gamma.-También llamado interferón inmunitario o de tipo II, es un tipo de citoquina producida por los linfocitosT y natural killer (NK) cuya función más importante es la activación de los macrófagos, tanto en las respuestas inmunitaria innatas como las respuestas celulares adaptativas, previamente interviene en la reclutación de monocitos de la circulación.
http://es.scribd.com/doc/12844390/Genetica-de-la-esclerosis-multiple-Una-perspectiva-epidemiologica-y-molecular
http://www.carloshaya.net/biblioteca/contenidos/home/produccion/rn22000pdf.pdf

La esclerosis múltiple y la presencia del gen herpesvirus humano 6 en LCR por PCR

En estudios realizados acerca del origen de la esclerosis múltiple, se ha abierto una gran controversia acerca de la presencia del gen HVH-6 en LCR de pacientes que presentan EM.

Ha sido detectado mediante reacción en cadena de la polimerasa (PCR) ADN
del HVH-6 en suero fundamentalmente de pacientes con EM tipo remitente-recurrente (EM-RR), al contrario que en controles y mediante técnica de inmunohistoquímica se ha objetivado HVH-6 en oligodendrocitos procedentes de zonas de desmielinización, pero también de zonas de sustancia blanca aparentemente sana de pacientes fallecidos con EM


Todo esto ha llevado a algunos autores a plantear la hipótesis que la replicación del HVH-6 en tejidos persistentemente infectados, en ciertos individuos susceptibles, originaría una respuesta inflamatoria que conllevaría a EM.
Pese a que en los estudios, no se ha encontrado amplificaciòn del ADN DEL HVH-6, se establece que hay gran relaciòn entre la capacidad que tiene para producir desmielinización en otras enfermedades desmielinizantes, la relación entre HVH- 6 y EM, asociado al alto grado de neuroinvasión del virus 21 y su capacidad para mantenerse latente y reactivarse periódicamente, todo lo cual podría explicar incluso, las exacerbaciones clínicas apreciadas en la EM.
http://www.elsevier.es/sites/default/files/elsevier/pdf/65/65v202n11a13037921pdf001.pdf

Epigenética de la esclerosis múltiple

Hablamos de la Epigenética haciendo referencia a los mecanismos de regulación genética que no implican cambios en la secuencias de ADN. Las moléculas del CMH o también llamado antígeno leucocitario humano (HLA) ayudan a diferenciar los antígenos propios de los antígenos extraños, por lo que estas moléculas han sido fuertemente asociadas con la aparición de diferentes enfermedades autoinmunes. Se ha encontrado asociación entre EM y alelos específicos del antígeno leucocitario humano(HLA), especialmente con el HLA clase II.

Se ha demostrado que el alelo HLA-DRB1*15 incrementa dos a tres veces el riesgo de desarrollar EM, el desarrollo de EM ha sido estudiado en modelo murino con expresión transgénica del HLA-DRB1*15, desarrollando inmunidad contra la proteína básica de la mielina (PBM).

 http://es.scribd.com/doc/12844390/Genetica-de-la-esclerosis-multiple-Una-perspectiva-epidemiologica-y-molecularhttp://www.gstriatum.com/info/index.php?option=com_content&view=article&id=971:causas-esclerosis-multiple&catid=55:salud&Itemid=59

La esclerosis múltiple y la traducción

Al hablar de la traducción  se podría decir que es una serie de procesos los cuales tienen como objetivo el paso de la información del ARNm a una proteína.
Al hablar de que en la EM los autoanticuerpos de la mielina participan en la degeneración de dicha lipoproteína.
La EM se ha estipulado que es por una ausencia del gen PMP22. Si hablamos de la traducción , en el caso de la EM, al tener la ausencia de dicho gen, se podría hablar de  que es probable que la proteína básica de la mielina (myelin basic protein MBP), y la proteína del SNC cuantitativamente menor, denominada glucoproteína oligodendrocitaria de la mielina (MOG), actúen como antígenos para las células T y B, respectivamente. La ubicación del MOG en la lámina más externa de la cubierta de mielina del SNC hace que sea el objetivo de los autoanticuerpos. Por ende, hubo una falla en la traducciòn de dichas proteinas, provocando el daño a la mielina del sistema nervioso perifèrico.

http://scielo.isciii.es/scielo.php?pid=S1131-57682001000900002&script=sci_arttext&tlng=pt

http://www.carloshaya.net/biblioteca/contenidos/home/produccion/rn22000pdf.pdf

La esclerosis mùltiple y su relaciòn con la transcripciòn

Al mencionar que la transcripción del ADN sucede como un proceso de expresión génica mediante el cual se transfiere información contenida en la secuencia del ADN hacia la de una proteína utilizando diversos ARN como intermediarios.

Tomando en cuenta los diversos estudios realizados acerca de las razones genéticas que provocan la esclerosis múltiple podremos mencionar una de las mas importantes como son:

La falla en el brazo corto del cromosoma 6, relacionado íntimamente con la codificación de los antígenos de histocompatibilidad(HLA) que presentan los antígenos peptídicos a las células T.

Por ende, se podría hablar que al momento de que se produce la transcripción, en dicho cromosoma se produce una falla y la histocompatibilidad presenta antígenos a las células T, y estas a su vez, en su rol inmunológico destruyen la mielina que en el sistema nervioso central se encuentra y produciendo la EM..

http://www.carloshaya.net/biblioteca/contenidos/home/produccion/rn22000pdf.pdf

http://bases.bireme.br/cgi-bin/wxislind.exe/iah/online/?IsisScript=iah/iah.xis&src=google&base=LILACS&lang=p&nextAction=lnk&exprSearch=276593&indexSearch=ID

Genes relacionados con la esclerosis mùltiple

Se han realizado estudios para encontrar la causa genética de esta enfermedad, y al hablar de estudios de ligamiento y asociación se ha encontrado que el determinante genético para la EM es el mayor complejo de histocompatibilidad localizado en el brazo corto del cromosoma 6.
Este complejo codifica a los antígenos al sistema de histocompatibilidad que presenta antígenos para las células T.
Se debe mencionar que la zona tipo II de este complejo se relaciona en gran proporción con la EM, especialmente con el alelo DR2 y el correspondiente haplotipo (DRB`1501,DQA1`0102,DQB1`0602).
Otros estudios hablan de una alta relación con los genes como la región de la cadena beta del receptor de la célula T en el cromosoma 7, el locus de la cadena pesada de la inmunoglobina del cromosoma 19
http://www.carloshaya.net/biblioteca/contenidos/home/produccion/rn22000pdf.pdf

Tamizaje y pruebas de confirmación

Tamizaje: 

Se denota como pruebas mas importantes para la detecciòn de la EM son:RMN de cráneo y medula, Hemograma completo, niveles séricos de vitamina B12 y ácido Fólico, VSG, proteína c reactiva, factor reumatoideo, ANAs, y VDRL.Se utilizò la RMN( Resonancia Magnètica Nuclear) con el fin de determinar daños importantes en la sustancia blanca, y en especial en la mielina, la cual es el principal componente afectado, ademas de signos y sìntomas que reflejen una disfunciòn en la via piramidal, cerebelar aferente y eferente, asì como fascìculo longitudinal medio,nervios òpticos y columna posterior del paciente

Pruebas de confirmación: 

Se lo realiza a una cierta población donde existe una alta prevalencia de EM, en ellos(pobladores del dpto. de Antioquia-Colombia) se extrajo 30 ml de sangre a partir de la cual se extrajo el DNA usando el método DTAB, CTAB(bromuro de hexadeciltrimelamonio el cual se adhiere fuertemente al ADN, desplaza las proteínas y previene la degradación). De esto,  6 alelos del HLA DQµ que se puede detectar: 1.1, 1.2, 1.3, 2, 3 y 4. determinando estos alelos genotipos posibles, siendo los de una frecuencia del alelo 3 que es menor significativamente en los individuos afectados. Esto se compensa con una disminución de los alelos 1.1, y 1.2 en los individuos normales.

http://www.uninet.edu/neurocon/congreso-1/conferencias/neurogenetica-3.html

Esclerosis múltiple

La Esclerosis múltiple es una enfermedad que se la ha estudiado hace mas de 130 años hasta la actualidad. Se define como una enfermedad crónica auto-inmune y desmielinizante. Esta enfermedad ataca al Sistema Nervioso Central, es decir: encéfalo, médula espinal y el nervio óptico.

Al hablar de una enfermedad autoinmune, hablamos de que el organismo ataca a si mismo, esto es porque los leucocitos T comienzan a destruir la mielina,

Se dice que la esclerosis empieza con un signo importante de mencionar como es la neuritis òptica,se manifiesta con problemas en los movimientos extraoculares, perdida de los sentidos, disartria, disfunciòn vesical, entre otros.

Se dice que esta enfermedad es muy comun entre las personasjòvenes de un promedio de entre 20 a 40 años.

BIENVENIDA

BIENVENIDA
Les doy la mas cordial bienvenida a mi blog que es dedicado a mi madre, a mis abuelitos y a mi prometido Andres, los amo, gracias por ser los pilares de mi vida.
De manera especial quisiera dedicar este blog a una persona que es muy importante en mi vida y que ahora desde el cielo nos cuida, Hector, gracias de todo corazón por cada enseñanza,  porque se que siempre fuiste como un padre para mi.
Agradezco mucho sus comentarios y sugerencias. Serán bienvenidas y tomadas en cuenta.
Espero sea de su total agrado este blog, ya que lleva mucho esfuerzo para poder descubrir que hay mas allá de lo que la ciencia ha podido descubrir.
Saludos.